肝脏是较早被用于基因治疗的器官，现已明确许多肝病是由单基因缺陷引起，因此相比其他由多基因缺陷引起的复杂疾病更适合开展临床基因治疗。肝靶向基因治疗面临的挑战在于肝细胞的有效靶向、载体基因组的稳定性和持续的高水平表达等，rAAV载体的出现及使用使这一难题的解决成为可能。今天小V就带大家一起学习一下rAAV在肝脏应用中的相关选择策略。
Vol.1 AAV血清型的选择 在肝脏中应用较多的有AAV2、AAV5、AAV8、AAV9及AAV-DJ等血清型，研究表明AAV8、AAV9和AAV-DJ对肝脏均具有较强的亲嗜性，其中AAV8嗜肝性更强，用于活体动物注射表现为免疫原性低，感染效率高，AAV-DJ的体内肝细胞转导效率与AAV8相近，且在体外实验中也能表现出较强的感染效率。 研究者可根据实验目的及动物模型的不同选择合适的血清型，其中AAV7、AAV8对小鼠肝脏感染具有较好效果；而在人体肝脏中AAV2、AAV5和AAV8亲和性较强。 如下图所示：无论是选用门静脉还是尾静脉注射，AAV8均能有较高的肝脏转导水平。 Vol.2 启动子的选择
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启动子 |
启动子 |
大小 |
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广谱启动子 |
CMV（常用） |
600bp |
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CAG |
944bp |
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特异性启动子 |
ALB（较大） |
2.4Kb |
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TBG（常用） |
460bp |
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ApoEHCR-hAAT |
1.3Kb |
图2. 与CMV相比，TBG启动子的肝脏特异性更强
(A) Mice received AAV9.CMV.EGFP.T2A.Luc. (B) Mice were injected with AAV9.TBG.EGFP.T2A.Luc.
（Chen SJ et al . Hum Gene Ther Methods. 2013）
Vol.3 常用的肝脏注射方式
肝脏对全身应用AAV有较高的亲合性，AAV在肝脏中的注射方式分为直接传送和外周传送两种（下表所示），其中尾静脉注射和腹腔注射是目前应用比较广泛的注射方式，操作者可根据实验目的选择合适的注射方式。