细胞外基质凝胶是一种从EHS小鼠肿瘤中提取的可溶性基底膜制剂，富含细胞外基质蛋白。其主要成分包括层粘连蛋白、IV型胶原、肝素硫酸蛋白多糖（HSPG）、nidogen，以及TGF-beta、EGF、IGF、FGF、组织型纤溶酶原激活剂等生长因子，这些生长因子是EHS肿瘤固有的。在20世纪80年代中期，丹麦的J. Engelbreth-Holm和Richard Swarm分别发现并特别描述了细胞外基质凝胶。主要的生产过程包括用生理盐水提取/洗涤肿瘤匀浆以获得可溶性蛋白，然后从产品中提取不溶性复合物的溶剂提取，以及在低温下用缓冲溶液进行透析以获得无色至淡黄色的溶液。

细胞外基质凝胶为组织和细胞提供了支持、拉伸强度和支架支持。它还作为细胞粘附和移动的三维结构，以及生长因子、趋化因子和细胞因子的储存库。此外，它还可以被用作细胞形态发生和分化的信号分子。

图：细胞外基质凝胶的应用指南

以下是使用由Arcegen Biologicals开发和生产的Arcegel细胞外基质凝胶及其他相关试剂进行实验所得到的结果。

侵袭实验和3D培养

侵袭实验

血管生成

图：HUVEC细胞血管生成实验结果及血管免疫荧光染色

体内成瘤

图：将HepG2细胞皮下植入到雌性BALB/c-nu小鼠体内，并观察了1个月。

肿瘤类器官培养

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Wnt3a类器官培养案例的结果

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其他类器官培养试剂

附录

问：如何解冻Arcegel基质凝胶，需要多长时间才能解冻？

答：将整瓶Arcegel基质凝胶放入装有碎冰的盒子中，然后将盒子放入4°C的冰箱中过夜解冻，确保有足够的碎冰。解冻后，旋转瓶子检查Arcegel基质凝胶是否完全解冻，确保没有冰晶或凝胶块残留。我们建议过夜解冻，而蛋白质浓度较高的Arcegel基质凝胶可能需要更长时间。不要直接将Arcegel基质凝胶的瓶子放入4°C冰箱中解冻，也不要将装有Arcegel基质凝胶的冰盒放在冰箱门上或靠近冰箱门的地方。下图供参考：

问：Arcegel基质凝胶解冻后的状态是怎样的？

答：标准的Arcegel基质凝胶解冻后应为清澈的液体，不含酚红，这表明其清晰透明；蛋白质浓度越高，解冻后的液体粘度越大。请参考下图中的Arcegel基质凝胶解冻后的状态，左边两瓶是高浓度型，右边两瓶是标准型。

问：如何分装和冷冻Arcegel基质凝胶以备使用？

答：解冻后，Arcegel基质凝胶可以分装到多个小管中，这些管子都应该是预冷的冷冻管，快速冷冻并储存，以避免反复冻融。使用过程中涉及的所有物品在使用前都应预冷，包括预冷的移液枪、枪头和管子来处理基质凝胶。

问：在融化Arcegel基质凝胶时发现凝胶，为什么无法融化？

答：Arcegel基质凝胶对温度非常敏感。其在超过10°C的温度下开始凝胶化，而在超过22°C的温度下凝胶化过程会加速。如果即使在正常条件下接收后也发生凝胶化，这可能是因为融化程序不当或在融化过程中环境温度上升，导致部分凝胶化。因此，必须严格按照融化程序指南操作，并确保在融化过程中保持低温环境。

问：如何稀释Arcegel基质凝胶？

答：通常，Arcegel基质凝胶可以与预冷的无血清培养基或pH 7.4的PBS稀释。由于不同批次之间的浓度可能存在差异，建议根据具体的工作浓度进行稀释，而不是使用比例稀释或稀释因子。

问：使用Arcegel时应注意哪些事项？

答：所有与Arcegel基质凝胶接触的耗材和试剂都应预冷，整个操作过程应在冰上进行，以保持低温环境。Arcegel基质凝胶对温度非常敏感，一旦温度超过10°C就开始凝胶化。

细胞因子使用指南：

离心：收到后，瓶内含有冻干粉末。在打开前，快速离心10,000-12,000 rpm 30秒，以确保任何可能脱落的蛋白质附着在瓶盖或瓶壁上，沉积在瓶底。

复溶：根据说明，用指定的溶剂复溶，目标浓度范围为0.1-1.0 mg/mL。注意：避免剧烈涡旋，因为这可能导致蛋白质变性。用移液枪头轻轻敲打或让溶液在室温下放置一段时间可以帮助溶解。

稀释：用含有0.1% BSA、10% FBS或5%海藻糖的PBS或基础培养基溶液稀释（确保无菌）。使用上述任何一种稀释剂稀释复溶的蛋白质溶液，根据所需的工作浓度调整稀释浓度，但不低于10 μg/mL。分装到小管中，储存在-20至-80°C。

使用：需要时，解冻一份分装的细胞因子，并加入到培养基中以达到所需的浓度。避免细胞因子反复冻融。