牛磺胆酸钠诱导严重急性胰腺炎模型(severe acute pancreatitis,SAP)
急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是临床上常见的急腹症,病因复杂,病死率达5%~10%,
重症AP死亡率高达20%~30%,目前发病机制尚未阐述,无特殊治疗方式。目前活体AP动物模
型制作常用方法大致有胰管结扎法、十二指肠闭袢法、胰胆管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、
胰胆管注射法结合静脉输注法、蛙皮素联用脂多糖腹腔内注射法等。
牛磺胆酸钠(Taurocholic acid Sodium Salt)容易通过逆行灌注胰腺,模拟胆汁反流,损伤胰腺,
诱导重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)。通过激活NF-κB途径,引起肺损伤。
逆行胰胆管灌注牛黄胆酸钠是一种经典的重症急性胰腺炎的造模途径。
图1 牛磺胆酸钠分子结构(CAS NO.145-42-6)
牛黄胆酸钠诱导胰腺炎建模步骤(仅供参考)
动物:
牛磺胆酸钠可以诱导大多数动物发生AP,但是此类模型主要应用于啮齿类动物(如大鼠和小鼠)。
给药方式:
牛磺胆酸钠可诱导急性坏死胰腺炎,这种模型多伴有多器官功能衰竭,适用于研究AP的局部和全身并发症,
用于临床胆汁反流性胰腺炎的
发病机制及药物治疗疗效的研究,可为研究SAP的靶向治疗提供工具。
1、将动物禁食过夜,并自由饮用新鲜自来水。通过腹腔注射10%氯醛脲(0.3mL/100g)进行麻醉。
2、动物麻醉后,经肠壁穿刺逆行胰胆管注射,正中切口开腹,轻拉出十二指肠,顺胆胰管寻找十二指肠开口,
使用穿刺针在近十二指肠开口端逆行刺入胰胆管,用动脉夹夹住胆管入肝处。
3、以0.1mL/min速度向胰管内匀速注射5%牛磺胆酸钠溶液(按0.1mL/100g剂量),对照组使用等量生理盐水
替代牛磺胆酸钠,注射完毕后留针8-10min,肉眼观察胰腺颜色变暗红,拔出穿刺针,松开血管夹,并缝合穿刺
的十二指肠壁以免肠液漏至腹腔,确认腹腔无活动性出血后层层缝皮即可。
模型判定指标:
注射后3、6、12、24h检测血清淀粉酶水平、胰腺组织的湿/干质量比率及病理组织学评分,观察24h生存指数
模型优点:
病因、致病机制及病变与临床急性出血坏死型胰腺炎(AHNP)相似,成功率高,重复性好,可比性高。
但对操作者的技术熟练度要求较高。
实验案例
图2 12小时时胰腺的形态学变化和每个时间点的胰腺组织学评分(引用自:http://dx.doi.org/10.1155/2015/685043)
实验采用雄性SPF Wistar大鼠,体重200~250g,穿刺逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠溶液诱导SAP,在不同时间点进行胰腺H&E病理切片染色,
对胰腺病理进行评分。
相关产品
分类 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
胰腺炎建模试剂 |
60321ES03 |
1 mg |
|
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