小牛肠碱性磷酸酶
产品名称: 小牛肠碱性磷酸酶
英文名称: Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
产品编号: 20427ES80
产品价格: 0
产品产地: 翌圣生物
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T11:21:51
使用范围: null
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Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
小牛肠碱性磷酸酶
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
储存 |
价格(元) |
Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP) 小牛肠碱性磷酸酶 |
20427ES80 |
1000U |
-20℃ |
936.00 |
产品描述
Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’端无磷酸基团,因而不可以和自身3’端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板,以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。
本品为小牛肠来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。
产品组分
组分编号 |
组分名称 |
规格 |
20427-A |
Alkaline Phosphatase (30 U/μl) |
1000U |
10×AP buffer |
1ml |
产品性质
来源(Source) |
|
质量控制(Quality Control) |
无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染 |
热灭活(Thermal Inactivation) |
在螯合剂存在下,65℃加热30min,99%活性不可逆丧失;使用苯酚,可使酶完全失活。 |
储存液条件(Storage conditions) |
10 mMTris-HCl (pH8.0), 1 mM MgCl2, 50mM KCl, 0.1 mM ZnCl2, 50% glycerol. |
活性定义(Unit definition) |
在pH9.8, 37℃条件下,以对**苯酚磷酸盐(p-nitrophenylphosphate)为底物,1分钟生成1µmol**酚(p-nitrophenol)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。 |
最佳pH(Optimal pH) |
该酶在底物浓度高的情况下其最佳反应pH为10,在底物浓度低时,最佳pH为8,此时该酶活性较高浓度底物时稍低。 |
优化体系(Optimal Buffer) |
AP Buffer (500mMTris-HCl, pH9.0; 10 mM MgCl2) |
运输和保存方法
干冰运输。-20℃保存,本酶在保存条件下及其稳定。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1 DNA去磷酸化
①在1.5ml离心管中加入下列试剂:
无菌ddH2O |
Up to 50µl |
DNA 片段* |
1-20pmol |
Alkaline Phosphatase |
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