产品说明
尿素是机体中蛋白质代谢的主要终产物,其在肝脏中产生并经由肾脏排出。通过尿素排泄,可以把有毒的氨排出体外。尿素指标对评定病人肾脏功能具有重要意义。一般来说,尿素含量升高可能意味着患有肾炎、肾缺血、尿路栓塞或某些非肾性疾病如充血性心力衰竭、肝脏疾病、糖尿病等;而尿素含量较少则有可能是急性肝功能不全或治疗性体液储留造成的。
简单﹑直接﹑高度自动化的尿素检测手段是十分理想的。本公司的尿素检测试剂盒可直接对生物样品检测,无需预处理过程。检测基于改良的Jung法,利用显色试剂与尿素反应生成有色复合物的特性,在520nm波长下测量,其颜色深浅与尿素浓度成正比。并且通过配方的改良,充分减小了未处理的样品中其他杂质(如氨NH3 或NH4-)的干扰。
产品特点
灵敏、准确:在96孔板中检测仅需5 μL样品,尿素线性测试范围在0.08 - 100 mg/dL (13 -17000 μM)。
简单、高通量:整个测试过程只需加入试剂并培养20分钟。通过96孔板上的高通量检测手段,每天可以测试上千个样品。
试剂稳定性高和多功能性:产品经过配方的改良,极大的提高了试剂和测试信号的稳定性,测试可采用比色皿或96孔板。
受样品干扰小:样品无需预处理,可以直接检测生物样品。
产品用途
1.直接检测血清、血浆、尿液、乳汁、细胞/组织培养物和支气管肺泡液等生物样品中的尿素含量。
2.用于药品和药理学研究,检测药物对尿素代谢的影响。
3. 可用于检测污水和土壤中尿素的含量。
试剂盒组成(96孔板供500份测试)
试剂A:50 mL
试剂B:50 mL
尿素标准品:1 mL 50 mg/dL
储藏条件:可在室温下运输。所有试剂在2-8℃环境下保存。如需长时间存放,请将标准品放在-20℃下保存。保质期六个月。
预防措施:本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。试剂A和试剂B含有硫酸,废试剂应分别收集回收。
试剂准备: 使用前,将试剂放置至室温。检测前等量混合试剂A和试剂B,配制足量工作试剂。配好的工作试剂需在20分钟内使用。
96孔板测试步骤
1. 固体样品用蒸馏水萃取,通过离心或过滤去除残余物。样品应清晰透明,无沉淀或杂质。血浆和血清样品可以直接检测(n = 1)。尿液样品在检测前需用蒸馏水稀释50倍(n = 50)。取透明平底的96孔板,分别将5 μL标准品、水(空白对照)和样品放入不同的孔中。
注意: 对于尿素含量较低(< 5 mg/dL)的样品,如细胞提取液、培养液、支气管肺泡液等,需在不同孔中分别放入50 μL的5 mg/dL尿素(通过稀释50 mg/dL标准品获得)、50 μL水(空白对照)和50 μL样品。
2.加入200 μL工作试剂并使其混合均匀。
3.室温下培养20分钟(低尿素样品50分钟),在520nm的波长下 (低尿素样品为430nm) 读取光密度。
比色皿测试步骤
将20μL样品、标准品和水分别放入测试试管内。加入1000 μL工作试剂并使其混合。室温下培养20分钟,在520nm的波长下读取吸光度。
注意:对于检测低尿素样品,标准品采用5 mg/dL的尿素,试管内加入200 μL样品、标准品和水,培养50分钟后读取OD430nm值。
浓度计算
OD样品, OD空白 和 OD标准分别是样本、空白对照和标准品的吸光度,n 是稀释系数。[STD] = 50(测低尿素样品时[STD] = 5)。
单位换算: 尿素氮 (mg/dL) = [尿素] / 2.14. 1 mg/dL尿素相当于 167μM, 0.001%或10 ppm
实验必需品(未提供)
1.采用96孔板测试:透明平底96孔板、96孔板吸光率阅读仪、吸液用仪器.
2.采用比色皿测试:比色皿、分光光度仪、吸液用仪器.